歡迎光臨 上海邦景實業(yè)有限公司！ 聯(lián)系電話：021-52960951 021-52960952
產(chǎn)品分類
瀏覽歷史
當(dāng)前位置: 首頁
> Elisa試劑盒 > 大鼠Elisa試劑盒 > 大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)ELISA試劑盒Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit
大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)ELISA試劑盒Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit
商品描述：
商品屬性
商品描述：
商品屬性
使用目的：
本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中待測物質(zhì)的含量。
大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)ELISA試劑盒Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit實驗原理：
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì)，再與HRP標(biāo)記 的待測物質(zhì)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終 的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物質(zhì)濃度。
ELISA試劑盒的組成及保存：
大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)ELISA試劑盒Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit標(biāo)本要求：
1．標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
樣品收集、處理及保存方法：
1）血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
計算和結(jié)果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品 OD 值< 臨界值（CUT OFF）者為金黃色葡萄球菌腸毒素(SE)陰性 陽性判定：樣品 OD 值≥ 臨界值（CUT OFF）者為金黃色葡萄球菌腸毒素(SE)陽性。
大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)ELISA試劑盒Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit注意事項：
1．操作嚴(yán)格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物請避光保存。
6．試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長檢測時，參考波長為 630nm
7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸，使用時必須注意安全。
大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)ELISA試劑盒Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit保存條件及有效期：
1．試劑盒保存：2-8℃。
2．有效期：6 個月
邦景金牌服務(wù)
友情鏈接：
